Gram Boyama Seti

4
5
Gram Boyama Seti
6
7
8
Amaç
Gram (+) ve Gram (-) bakterilerin ışık mikroskopisi ile
gösterilmesinde kullanılır.
9
10
Kit
● Alan: Genel laboratuvar kullanımı için tasarlanmıştır.
● Dallar: Mikrobiyoloji.
● Katalog no: 5026
● Kullanım süresi: 24 ay.
● Saklama sıcaklığı: 5-25 °C.
● Boyama süresi: Yıkamalar dahil 4 dakika.
● Etap sayısı: Yıkamalar dahil 9 etap.
Kit komponentleri
KOMPONENTLER
Ayıraçtan 0,5 ml (10
damla) ile
Ayıraçtan 0,3 ml (6
damla) ile
A- Kristal Moru
Çözeltisi
B- Gram Lugol
Çözeltisi
C- Denatüre Alkol
Çözeltisi
D-Gram Safranin
Çözeltisi
100T
100 test
500T
500 test
1000T
1000 test
167 test
835 test
1670 test
1x50 ml
1x250 ml
1x500 ml
1x50 ml
1x250 ml
1x500 ml
2x50 ml
2x250 ml
2x500 ml
1x50 ml
1x250 ml
1x500 ml
Numuneler ve hazırlık
● Boyamada gerekli cihaz, alet ve ekipman: Işık mikroskobu,
daldırma objektifi, örtme boyaması ünitesi, piset, mavi pipet
ucu, 250-1000 µl otomatik pipet, lam kurutma aparatı,
laboratuvar saati, kronometre, ısıtıcılı tabla veya bunsen beki,
emici kağıt, lamlar, lameller, daldırma yağı (GBL-2305), distile
su (GBL-8046), elinizdeki boyama kiti (GBL-5026).
● Numune ve hazırlama: Numuneler ince bir şekilde lama
yayılır. Havada kurutulur.
● Tespit: . Alevden geçirilerek veya ısıtılarak tespit edilir.
Alevle ısıtarak tespit işlemi pratik olduğundan yaygın bir
şekilde kullanılır.
● Boyama metodu: Örtme.
● 10 damla = 0,5 ml.
● Kontrol: Gram (+) ve Gram (-) bakteriler.
Boyama metodunun uygulanması
1
Preparatı “A- Kristal Moru Çözeltisi” ile örtün. 1
dakika sonra silkeleyerek dökün.
2
Distile suyla 15 saniye yıkayın.
3
Preparatı “B- Gram Lugol Çözeltisi” ile örtün. 1 dakika
sonra silkeleyerek dökün.
Baskı No: 03 © 1994-2012
Distile suyla 15 saniye yıkayın.
Preparatı “C- Denatüre Alkol Çözeltisi” ile örtün 15
saniye sonra lamı silkeleyerek ayıracı uzaklaştırın.
Bu işlemi bir kez daha tekrarlayın.
Distile suyla 15 saniye yıkayın.
Preparatı “D- Gram Safranin Çözeltisi” ile örtün. 30
saniye sonra lamı silkeleyerek ayıracı uzaklaştırın.
Distile suyla 15 saniye yıkayın.
Havada tercihen ısıtıcılı tabla üzerinde kurutun.
Mikroskopta inceleyin.
Netice
Gram pozitif mikroorganizmalar
Gram negatif mikroorganizmalar
Mavimsi mor
Kırmızı
Açıklama
Gram boyaması prokaryotik hücrelerin tanınmasının ilk
adımında büyük bir önem taşır. Bakteriyolojide kokların hepsi
(Neisseryalar ve Veillonellalar hariç), spor oluşturan basillerin
hepsi, küçük bir grup spor oluşturmayan basillerin hepsi Gram
(+)'tir. Spirilla, riketsiya, klamidya ve spor oluşturmayan
basillerin büyük bir grubu Gram (-)'tir.
Tehlikeler ve uyarılar
A ayıracı yanıcıdır. C ayıracı yüksek derecede yanıcı, zehirli,
tahriş edicidir. D ayıracı yanıcı, zehirlidir. Laboratuar
çalışmasıyla ilgili güvenlik kurallarına uyunuz. Gerekirse ürün
güvenlik belgesini okuyunuz.
Kaynaklar
G. Clark. 1981. Staining procedures. Williams Wilkins.
R. D. Lillie. 1965. Histopathologic technic and practical
histochemistry. Ed. 3. McGraw Hill. New York.
J. W. Barholomew. 1962. Variable influence results and the
precise definition of steps in Gram staining as a means of
standardizing the results obtained. Stain Tech. 37. 139-155.
G. J. Hucker. H. J. Conn. 1927. Further studies on the
methods of Gram staining. N. Y. Agric. Exp. Stn. Tech. Bull.
128.
Üretici
GBL Gül Biyoloji Laboratuvarı
İMES C Blok 305 Sokak No: 16
Dudullu İstanbul Türkiye
0-216-3641500 (tel)
0-216-3141569 (fax)
[email protected]
www.gbl.com.tr