Wheatley Trikrom Protozoa

Wheatley Trikrom Protozoa
Amaç
Protozoon kistleri ve trofozoitlerinin ışık mikroskobisi ile
incelenmesinde ve ayırt edilmelerinde kullanılır.
Kit
● Alan: Genel laboratuvar ve profesyonel kullanım içindir.
● Dallar: Mikrobiyoloji.
● Katalog no: 5028
● Kullanım süresi: 12 ay.
● Saklama sıcaklığı: 15-25 ℃.
● Boyama süresi: Yıkamalar dahil 15 dakika.
● Etap sayısı: Yıkamalar dahil 3 etap.
Kit komponentleri
KOMPONENTLER
Ayıraçtan 0,5 ml (10 damla) ile
Ayıraçtan 0,3 ml (6 damla) ile
50 ml’lik boyama kabı hesabıyla
A- Alkolik çözelti
B- Wheatley trikrom çözeltisi
C- Asetik etanol
100T set
100 test
167 test
1 kap
2x50 ml
1x50 ml
2x50 ml
1000T set
1000 test
1670 test
10 kap
2x500 ml
1x500 ml
2x500 ml
Numuneler ve hazırlık
● Boyamada gerekli cihaz, alet ve ekipman: Işık mikroskobu,
daldırma objektifi, 50 ml (veya 15 ml) hacimli ve kapaklı
boyama kapları (daldırma metoduyla boyama yapılıyorsa)
veya örtme boyaması ünitesi, piset, mavi pipet ucu, 250-1000
µl otomatik pipet, lam kurutma aparatı, laboratuvar saati,
kronometre, emici kağıt, susuzlaştırıcı ve temizleyici
solventler, lamlar, lameller, örtme ortamı (GBL-2515),
daldırma yağı (GBL-2305), distile su (GBL-8046), elinizdeki
boyama kiti (GBL-5028).
● Numune ve hazırlama:
Vücut sıvılarından elde edilen hücre numunelerinin
hazırlanması: En yaygın olarak kullanılan feçestir. Bunun
yanında diğer vücut sıvıları da bu boyama metoduyla
incelenebilir. Dışkı numunesi bir bütün olarak incelenir. En
kanlı ve sümüklü bölgesinden bir çöple 1-2 mercimek tanesi
büyüklüğünde dışkı numunesi alın. Temiz bir lam üzerine
koyun. Kürdanla veya bir özeyle numuneyi kalınca bir şekilde
yayın. Tespit işleminden yaymanın örtülmesine ve hatta
mikroskopta ilk incelemesine kadar geçen süre içinde
yaymanın kurumasından mümkün olduğunca kaçınılmalıdır.
Kuruduğu taktirde yapıdaki ince strüktürlerin tespitleri
zorlaşmaktadır. Hassas olmayan incelemeler için havada
kurutma işleminin uygulanmasının bir sakıncası yoktur.
● Tespit: Özellikle civalı fiksatifleriyle.
● Gömme: Parafin veya glikol metakrilatlı ortamlarla.
● Lam: Temiz veya poli-L-lizinli.
● Boyama metodu: Örtme veya daldırma.
● Lamel örtme: Sentetik reçineyle.
● 10 damla = 0,5 ml; 5 damla = 0,25 ml.
● Uyarı: Civalı fiksatifler kullanılmışsa boyamadan önce iyot
ve tiyosülfat çözeltileri kullanılarak civa uzaklaştırılmalıdır.
Baskı No: 02© 1994-2012
Boyama metodunun uygulanması
1 Preparatı “A- Alkolik çözelti” kabına daldırın. 5 dakika
sonra lamı silkeleyerek boyama kabından çıkarın.
2 Preparatı “B- Wheatley trikrom çözeltisi” kabına
daldırın. 10 dakika 50 C derecedeki su banyosunda
enkübe edin. Süre bitiminde silkeleyerek boyama
kabından çıkarın.
3 Preparatı “C- Asetik etanol” kabına daldırın. 3 kez her
biri bir saniye süreyle olmak üzere daldırıp çıkarın. 3
saniye bitiminde lamı silkeleyerek boyama kabından
çıkarın.
4 Çeşitli alkollerle susuzlaştırın. Ksilenle temizleyin.
Sentetik reçineyle örtün.
Netice
Protozoon trofozoitleri
Protozoon kistleri
Helmint yumurtaları,
larvalar
Arka alanlar, mayalar
Sitoplazma
Çekirdek, kromatin,
bakteriler, eritrositler
Aşikar. Mavimsi yeşil renkli;
bazen morumsu.
Aşikar. Biraz daha fazla mor.
Seçilmeyebilir
Yeşil
Mavimsi yeşil
Kırmızı bazen morumsu.
Açıklama
Örtme metoduyla çalışıyorsanız 2. etapta alttan ısıtma
uygulayın. A ve C ayıraçları azalınca (alkoliktirler) ekleme
yapın.
Tehlikeler ve uyarılar
A ve C ayıracı yanıcıdır. C ayıracı tahriş edicidir. Laboratuvar
çalışmasıyla ilgili güvenlik kurallarına uyunuz. Gerekirse ürün
güvenlik belgesini okuyunuz.
Kaynaklar
1. W. Wheatley. 1951. Arapid staining procedure for
intestinal amobae and flagellates. Am. J. Clin. Path. 21.
990-991.
2. G. Gomori. 1950. A rapid one step trichrome stain. Am. J.
Clin. Path. 20. 661-663.
3. L. S. Garcia. 2001. Diagnostic medical parasitology. Ed. 4.
ASM Pres. Washington. D. C. 723.
4. P. J. Masson. 1929. Some histological methods:
Trichrome stainings and their preminary technique. J.
Tech. Methods. 12.
5. G. Clark. 1981. Staining procedures. Williams Wilkins.
6. R. D. Lillie. 1965. Histopathologic technic and practical
histochemistry. Ed. 3. McGraw Hill. New York.
Üretici
GBL Gül Biyoloji Laboratuvarı
İMES C Blok 305 Sokak No: 16
Dudullu İstanbul Türkiye
0-216-3641500 (tel)
0-216-3141569 (fax)
www.gbl.com.tr