Ek Dosyayı indir

CK-NAC
KREATİN KİNAZ
CK-10100
CK-10250
CK-10500
CK-10160A
R1: 2
R2: 2
R1: 5
R2: 1
R1: 5
R2: 1
R1: 4
R2: 4
x 40 mL
x 10 mL
x 40 mL
x 50 mL
x 80 mL
x 100 mL
x 32 mL
x 8 mL
CK-10228M
CK-10228P
R1: 4
R2: 2
R1: 4
R2: 2
x 45 mL
x 24 mL
x 45 mL
x 24 mL
: 2-8 °C
KULLANIM AMACI
İnsan serumundaki Kreatin Kinaz (CK) aktivitesinin in vitro olarak belirlenmesi.
METODOLOJİ
CK enzimi kreatin fosfat varlığında ADP’ nin fosforilasyonunu ATP ve kreatin
oluşturacak şekilde katalize eder. Yardımcı enzim Heksokinaz (HK), ADP ve glikoz6-fosfat (G-6-P)üretmek üzere glikozun fosforilasyonunu oluşan ATP yoluyla katalize
eder. G-6-P, NADH’ın oluşumu ile birlikte 6-fosfoglikonat’ a okside edilir.
PRENSİP:
CK
ADP + Kreatin fosfat
Kreatin + ATP
HK
ATP + Glikoz
ADP + Glikoz-6-fosfat
G6PDH
+
G-6-fosfat + NAD
6-Fosfoglikonat + NADH + H
NADH oluşumunun 340nm de ölçülen absorbans değeri CK aktivitesi ile doğru
orantılıdır.
REAKTİFİN BİLEŞİMİ
Aktif İçerik
Konsantrasyon
İmidazol (pH 6.7)
100 mM
Kreatin fosfat
30 mM
ADP
2 mM
AMP
5 mM
NADP
2 mM
N-Asetilsistein (NAC)
20 mM
Heksokinaz (Mikrobiyal)
2500 U/L
G6PDH (Mikrobiyal)
1500 U/L
Glikoz
20 mM
Magnezyum asetat
10 mM
EDTA – Na2
2 mM
Diadenozin pentafosfat
10 M
Koruyucu olarak sodyum azid ile birlikte reaksiyona girmeyen dengeleyiciler ve
dolgular
Uyarılar:
1. Bu reaktif sadece in vitro teşhis içindir.
2. Reaktif cildi tahriş edebilir. Teması halinde cildi suyla yıkayın.
3. Reaktif koruyucu olarak sodyum azid içermektedir. Kuru haldeyken bakır ve
kurşun ile reaksiyona girip patlayıcı metal azitleri oluşturabilir.Elden
çıkarıldığında, azid birikimini önlemek amacıyla bol suyla yıkayınız.
Reagent 1 İmidazole içerir
R60/61
Doğurganlığı azaltabilir,doğmamış çocuğa zarar verebilir.
Maruziyetten sakının,kullanmadan önce özel kullanma talimatını edinin.
REAKTİFİN HAZIRLANMASI
Her iki reaktif kullanıma hazır sıvı halde temin edilir. Çalışma reaktifi: 4 hacim
Reaktif 1 ile 1 hacim Reaktif 2 karışımı ile hazırlanır.
( örneğin 20 mL Reaktif.1 ile
5 mL Reaktif2)
REAKTİFİN DEPOLANMASI
1. Reaktifleri 2-8˚C de muhafaza edin.
2. Reaktifler 2-8˚C’de saklandığında, kutu üzerindeki son kullanma tarihine kadar
stabildir.
3. Çalışma reaktifi 2-8˚C’de muhafaza edildiğinde 3 hafta dayanır.
4. Reaktifleri dondurmayın.
REAKTİFİN BOZULMASI
AŞAĞIDAKİ DURUMLARDA REAKTİFİ KULLANMAYIN:
1. 340 nm’de suya karşı belirlenen ilk absorbans 0.8 den büyük ise
2. Reaktif parametreleri performans parametrelerini karşılamıyor ise
ÖRNEK ALINMASI VE DEPOLANMASI
1. Serum tercih edilen örnektir.
2. Serum içersindeki CK buzdolabında (2-8˚C’de) yedi gün dayanır. Numune
buharlaşmaya karşı korunduğu takdirde bir aya kadar
donmuş olarak
saklanabilir.
3. Zorlu egzersiz veya fiziksel aktivite serum CK seviyesini yükseltebilir.
İNTERFERAN ETKİ
1. Hemoglobin, bilirubin, lipemi interferan seviyelerini belirlemek üzere incelemeler
yapılmış ve aşağıdaki sonuçlar elde edilmiştir:
Hemoglobin:
Hemoglobinin belirgin interferan etkisi 400 mg/dL’ ye kadar söz konusu değildir.
Bilirubin:
Bilirubin belirgin interferan etkisi 25.8 mg/dL’ye kadar söz konusu değildir.
Lipemi :
1086 mg/dL’ye kadar ölçülmüş Trigliserit seviyesinde belirgin lipemi interferan etkisi
söz konusu değildir.
2. Bir dizi ilaç ve reaktifler CK aktivitesini etkileyebilir.
GEREKLİ OLUP TEMİN EDİLMESİ GEREKEN İLAVE DONANIM
1. 37˚C sabit sıcaklığa sahip 340nm de absorbans ölçebilecek bir klinik kimya
analizörü.
2. Deiyonize su ve ilgili donanım, örneğin pipetler
3. Analizörün ilgili sarf malzemeleri, örneğin numune ve okuma kapları
4. Kontrol materyalleri.
PROSEDÜR
Dalga boyu
: 340 nm
Sıcaklık
: 37°C
Optik yol
: 1cm
Test tipi
: Kinetik
Yön
: Artan
1. Reaktifler oda ısına getirilir. (15-30°C).
2. Distile su ile fotometrenin sıfır (0) ayarı yapılır.
Numune
Reaktif 1
800 L
Reaktif 2
200 L
Numune
40 L
3. Karıştırılır ve 37°C de inkübe edilir.
4. 180 saniye sonra başlangıç absorbansı okunur.
5. Tüp tekrar 37°C ye konur.
6. Sonraki 3 dakikada her dakika başı okuma tekrarlanır.
7. Dakika başına ortalama absorbans farkı hesaplanır. ( Abs/Min.)
Abs/Min değerinin 4180 faktörü ile çarpımında IU/L cinsinden sonuç elde edilir.
PROSEDÜR NOTLARI:
1500 U/L üzeri değerdeki numuneler 1:1 serum fizyolojik ile sulandırılıp tekrar analiz
edilerek sonuçlar iki ile çarpılmalıdır.
HESAPLAMA
Bir ünite(U/L) : İstenilen koşullarda dakikada bir mikromol substratın dönüşümünü
katalizleyen enzim miktarıdır.
CK-NAC (U/L)= Abs/dak x 4180
KALİBRASYON
Bu prosedür belirlenen test şartlarında 340nm’da 6.22 olarak alınan NADH‘ nın
milimolar ekstensiyon katsayısı vasıtasıyla standartlaştırılır.
KALİTE KONTROL
Reaksiyonun bütünlüğü, CK-NAC değeri bilinen iki seviyeli kontrol kullanılarak takip
edilmelidir.
NORMAL DEĞER ARALIĞI
Aşağıdaki değerler 37˚C de yapılan ölçümlere dayanmaktadır.
Erkekler:
24 – 195 U/L
Kadınlar:
24 – 170 U/L
Yeni doğanlar:
Yetişkin değerlerinin 2 – 3 katı.
Her laboratuarın kendi normal limitlerini oluşturması tavsiye edilir.
PERFORMANS
LİNEERİTE:
Tavsiye edildiği şekilde çalışıldığında, ölçüm 1500 U/L ‘ye kadar Lineerdir.
KIYASLAMA
Bu prosedürle benzeri bir prosedür arasında yapılan incelemeler aşağıdaki sonuçları
vermiştir:
Numune çiftlerinin sayısı:
47
Numunelerin limitleri:
8 - 1287 U/L
Etkileşim Katsayısı:
0.9996
Eğim:
0.9975
Kesinti:
-0.8(U/L)
Doğruluk:
Çalışma İçerisinde
Seviye 1
Seviye 2
Seviye 3
n=40
Ortalama (U/L)
84.1
154.5
556.2
S.D. (U/L)
2.0
3.4
8.1
C.V. (%)
2.4
2.2
1.5
Total
Seviye 1
Seviye 2
Seviye 3
n=40
Ortalama (U/L)
84.1
154.5
556.2
S.D. (U/L)
2.5
3.6
8.7
C.V. (%)
2.9
2.3
1.6
BİLİMSEL KAYNAKÇA
1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia, W.B. Saunders Co., pp. 682-689
(1982).
2. Oliver, IT., Biochem. J. 61:116 (1955).
3. Nielson, L., Ludvigsen, B.,J. Lab. Clin. Med. 62:159 (1963).
4. Rosalki, S.B., J. Lab. Clin. Med. 69:696 (1967).
5. Szasz, G., et al, Clin. Chem. 22:650 (1976).
6. The Committee on Enzymes of the Scandinavian Society for Clinical Chemistry and Clinical
Physiology, Scand., J. Clin. Lab. Invest. 36:711 (1976).
7. The Committee on Enzymes of the Scandinavian Society for Clinical Chemistry and Clinical
Physiology, Scand. J. Clin. Lab. Invest. 39:1 (1979).
8. Engle, W.K., Meitzer, H., Science 168:273 (1970).
9. Young, D.S., at al, Clin. Chem. 22:1D (1976).
10. Ziegenhorn, J., et al, Clin. Chem. 22:151 (1976).
11. McComb, R.B., et al, Clin. Chem. 22:141 (1976).
12. Stein W. Creatine Kinase (total activity) creatine kinase isoenzymes and variants. Thomas L.
ed. Clinical laboratory diagnostics, Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; p71-80 (1998).
Caution, refer to accompanying documents.
Beraberindeki dokümanları inceleyiniz.
Consult instructions for use.
Kullanım için prospektüsü okuyun.
Biological risk.
Biyolojik risk
Do not dispose of in environment.
Çevreyi kirletmeyin çöpe atınız.
Manufacturer / Üretici
Bilimsel Tıbbi Ürünler Paz.San.Tic.Ltd.Şti.
Rev.Tarih / No: 02.12.2014 / 5
P:1/2
BİLİMSEL TIBBİ ÜRÜNLER PAZARLAMA SANAYİ VE TİCARET LİMİTED ŞİRKETİ
Dokuz Eylül Mah. 312/1 Sokak No:12 Gaziemir - İZMİR - TURKEY • Tel.:+90.232. 262 60 83 (pbx) • Fax:+90.232. 250 61 23 • +90.232.252 0 452 (pbx)
web: www.btproducts.com.tr - web: www.bilimseltip.com